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在ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠實(shí)驗(yàn)中,用直接法測(cè)定抗體,不能直接將待測(cè)抗體直接用酶符號(hào),然后直接加底物。而要加酶標(biāo)抗抗體呢?
假如將酶符號(hào)到待測(cè)抗體上,相對(duì)經(jīng)典的直接法愈加繁瑣,并且您在探索符號(hào)條件時(shí)不能保證操作失誤導(dǎo)致待測(cè)抗體失活;酶標(biāo)二抗現(xiàn)在是已經(jīng)商品化了的,被大規(guī)模生產(chǎn),購買后使用方便。假如你的直接做的好的話,辦法被優(yōu)化了后,一抗二抗顯色,總共的時(shí)刻加起來,出成果不會(huì)超越2-3小時(shí)。
可以用直接ELISA法,便是用抗體包板,在抗原上符號(hào)酶,然后顯色,這樣與直接法相比就減少了一步,縮短了時(shí)刻。但是,直接法和直接法,他們各有優(yōu)缺點(diǎn),需求依據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求而定。
1.待測(cè)抗體一般是免疫后發(fā)生的抗體,其中有免疫失敗和抗體過少等要素存在,用酶符號(hào)有許多不確定性,如用酶符號(hào)前期有測(cè)不出效價(jià)的或許,造成不必要的困惑。
2.ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠酶聯(lián)免疫中酶標(biāo)抗抗體和抗體結(jié)合后有巨大的信號(hào)放大效果,可以將信號(hào)擴(kuò)展千倍以上,適合于較低抗體量的測(cè)定。
3.篩出單抗后可以考慮直接酶標(biāo)抗體,不過在確定測(cè)定體系上要費(fèi)不少功夫。