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(1)血清 需求長時(shí)刻保存的血清有必要儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)刻切勿超越1個(gè)月。因?yàn)檠褰Y(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預(yù)留必定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
(2)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*凍結(jié)的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非有必要,一般不主張作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)構(gòu)成血清沉淀物明顯增多,并且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞縮短, 肥大細(xì)胞和血小板開釋組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
(3)瓶裝血清凍結(jié)需選用逐漸凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待悉數(shù)溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(當(dāng)心勿構(gòu)成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃凍結(jié),這樣因溫度改變太大,簡單構(gòu)成蛋白質(zhì)凝集而呈現(xiàn)沉淀。
(4)一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
(5)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結(jié)后血清中纖維蛋白構(gòu)成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量。可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的構(gòu)成會(huì)明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞成長,但如果置疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,替換另一批號(hào)的血清。
(6)血清 切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,一起血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量。