發(fā)布時(shí)間: 2010-06-21 點(diǎn)擊次數(shù): 1592次
細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從大小來(lái)講,細(xì)胞培養(yǎng)瓶約可分為約600ml,250ml,50ml和25ml的,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。600ml 、300ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),50ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。當(dāng)然還有其他如圓形的等,都可根據(jù)個(gè)人愛好和實(shí)驗(yàn)需要自己選擇。
根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)瓶制作材料的不同,也有玻璃和塑料之分,這里談一點(diǎn)自己的淺見。不同的細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度不一樣,所以在實(shí)驗(yàn)中我們常常會(huì)遇到一些細(xì)胞消化半天也沒有起色,導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不斷下滑,直至zui后的死亡以至于實(shí)驗(yàn)進(jìn)展的不順利。當(dāng)然,有時(shí)候是可以通過(guò)加一些EDTA等來(lái)增強(qiáng)胰酶的能力,或者提高胰酶的濃度來(lái)實(shí)現(xiàn),在培養(yǎng)一些細(xì)胞過(guò)程中,我發(fā)現(xiàn),一些細(xì)胞對(duì)玻璃和塑料制品粘附能力不同,如RAW264.7,平滑肌細(xì)胞等,在轉(zhuǎn)換培養(yǎng)瓶之后,可以發(fā)現(xiàn)好消化了很多,并且在回到原制品的培養(yǎng)瓶時(shí)不會(huì)改變它的貼壁能力。這里希望有經(jīng)驗(yàn)的戰(zhàn)友可以分享你們的經(jīng)驗(yàn)。
關(guān)于培養(yǎng)板的購(gòu)買其實(shí)也沒有什么經(jīng)驗(yàn),想說(shuō)的就是要盡量避免購(gòu)買國(guó)產(chǎn)的培養(yǎng)板,國(guó)產(chǎn)的一些培養(yǎng)瓶還可以,但是培養(yǎng)板我們買過(guò)很多國(guó)產(chǎn)的,確實(shí)效果不是很好,細(xì)胞在里面基本上長(zhǎng)的非常非??拇~。所以經(jīng)費(fèi)富余的情況下,這些東西能買進(jìn)口的就買吧。大公司的基本都可以買,BD,Corning等等。這些東西原則上是一次性的,但是我們大部分實(shí)驗(yàn)室根本不可能做到,其實(shí)泡酸,洗干凈再用也沒問(wèn)題,畢竟我們沒有老外那么富足的經(jīng)費(fèi),所以我們就累點(diǎn)吧,多做點(diǎn)體力活鍛煉一下身體吧。
細(xì)胞培養(yǎng)耗材有好多牌子,的是Corning Costar、Nunc和BD Falcon三個(gè)牌子;較好的有德國(guó)的Greiner和瑞士的TPP,這兩個(gè)牌子比較前面的三個(gè)主要劣勢(shì)是在產(chǎn)品種類單一和度不夠,另外質(zhì)量方面也可能有一些差距;再下面就是Orange等一些雜牌子了,無(wú)論質(zhì)量還是度都差距較大。
因?yàn)閲?guó)內(nèi)目前主要還是Corning Costar,Nunc和Falcon三家的天下,下面就分別講講他們各自情況:
Corning Costar
這本來(lái)是兩家公司,Corning是美國(guó)的一個(gè)世界500強(qiáng)公司,下面有一堆業(yè)務(wù),涉及光纖、玻璃、陶瓷等各個(gè)領(lǐng)域。它的Life Science部門則作的是細(xì)胞培養(yǎng)耗材、移夜器、過(guò)濾等一系列的實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品;后Corning收購(gòu)了Costar的細(xì)胞培養(yǎng)耗材這塊業(yè)務(wù),合稱Corning Costar。
Corning(Costar)的質(zhì)量是同類產(chǎn)品中的,幾乎沒聽說(shuō)過(guò)投訴它質(zhì)量的;它的產(chǎn)品線也全,其它牌子有的幾乎它都有(除了BD的IVF和BioCoat,以及Nunc的多層培養(yǎng)瓶個(gè)別幾個(gè)產(chǎn)品),它自己也有一些有特色的東西,比如Costar的Transwell,Corning的塑料試劑瓶和過(guò)濾器。此外,Corning在國(guó)內(nèi)做的時(shí)間也zui長(zhǎng),度高,客戶基礎(chǔ)好。
Nunc
Nunc,一個(gè)丹麥的牌子。95年的時(shí)候和Nalgene合并,Nalgene大家肯定都聽說(shuō)過(guò),幾乎每個(gè)新建實(shí)驗(yàn)室都會(huì)買Nalgene,大家賣Epp的離心機(jī)時(shí)是肯定經(jīng)常會(huì)碰到老師要求配大離心管的,哪些都是Nalgene的。國(guó)內(nèi)前兩年做得不錯(cuò),不過(guò)現(xiàn)在好像不怎么樣了,估計(jì)主要還是價(jià)格下不來(lái),另外還有個(gè)分銷商的問(wèn)題,它現(xiàn)在的代理商是Invitrogen,下面好像就亂放分銷商了,這些分銷商良莠不齊,賣得掉的亂報(bào)高價(jià),賣不掉的就亂降價(jià)。不過(guò)Nunc還是個(gè)很好的牌子,產(chǎn)品很全,另外它的酶標(biāo)板很有優(yōu)勢(shì),F(xiàn)alcon和Corning都沒得比,估計(jì)也只有Greiner和它有一拼?,F(xiàn)在沒做好的原因主要還是代理商。
BD Falcon
Falcon應(yīng)該叫做Discovery Labware。這個(gè)Labware的供應(yīng)商那就是美國(guó)的BD公司了。BD公司比前兩家的Corning和Apogent也絲毫不差,一家百年老店,進(jìn)過(guò)500強(qiáng)。BD Bioscience(BD 的生命科學(xué)部分)好幾個(gè)產(chǎn)品:Pharmingen、Clontech和Discovery Labware。Discovery Labware本來(lái)只有Falcon,后來(lái)加了Biocoat,前段時(shí)間BD收購(gòu)了Genetest,也算在了Labware的下面,但其中zui主要的就是Falcon。據(jù)BD說(shuō),F(xiàn)aclon是這個(gè)領(lǐng)域里zui早的牌子,國(guó)外占有率zui高,一年能賣上億美金,Corning什么的都是后來(lái)者,沒得比。另外BD在培養(yǎng)器皿的處理方面很有一套,據(jù)她的技術(shù)人員說(shuō),這些培養(yǎng)器皿都是在密閉環(huán)境下處理,表面處理更均一;其它牌子都是在一個(gè)開放的環(huán)境下進(jìn)行的處理,相對(duì)來(lái)說(shuō)就差一些;另外Falcon的包裝不錯(cuò),是雙層的,有一些中間商就會(huì)為了這點(diǎn)要選Falcon,因?yàn)檫@樣的包裝適合長(zhǎng)途運(yùn)輸。