小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒操作步驟 實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00ul,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。 為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒使用說明書 洗板方法 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。 自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。 特異性 本試劑盒可同時檢測重組或天然的大鼠SOD,且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。 計算 以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐 標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒注意事項 1. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。 2. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 3. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。 4. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。 5.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。 6.底物請避光保存。 檢測范圍: 7.6 U/ml -500 U/ml 說明 1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。 2.有效期:6個月 3.濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。 4.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。 |