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盒裝ELISA試劑盒的基本原理
1)抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
2)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;
3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
盒裝ELISA試劑盒可能存在的弊端
ELISA是目前應(yīng)用zui廣泛的免疫標(biāo)記檢測方法。但由于ELISA自身存在的缺陷和某些人為因素都可造成實(shí)驗(yàn)性誤(漏)診的發(fā)生,分析引起實(shí)驗(yàn)誤差因素。
除人為因素外,影響原裝ELISA試劑盒的弊端如下:
1)試劑的運(yùn)輸與貯存ELISA試劑盒熱穩(wěn)定性差,遇熱后靈敏度、特異性都將降低。在37℃下放置1d相當(dāng)于4℃~10℃保存1.6個(gè)月,而ELISA試劑盒的貨架壽命只有6個(gè)月,這樣就要求試劑盒的在4℃~10℃下運(yùn)輸貯存,各實(shí)驗(yàn)室老師在試劑盒貯存環(huán)節(jié)上都能達(dá)到要求,但目前尚無法保證試劑盒的冷鏈運(yùn)輸,在炎熱的夏季,試劑盒經(jīng)過幾天的高溫,長途運(yùn)輸,其貨架壽命也將消耗殆進(jìn),如各實(shí)驗(yàn)室還按試劑說明書的有效期使用至6個(gè)月,將無法保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2)試劑盒質(zhì)量試劑盒質(zhì)量是關(guān)系到ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確度的核心問題,目前ELISA試劑盒的廠家和品牌眾多,產(chǎn)品質(zhì)量也參差不齊。
盒裝ELISA試劑盒主要應(yīng)用在以下方面:
1)顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
2)免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
3)定量檢測體液中抗原或抗體成份。
4)研究抗酶抗體的合成。