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說(shuō)明
Caco-2細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境的要求非常之高。除了大家熟知的培養(yǎng)液條件的苛刻外,對(duì)生空間問(wèn)題要求也比較高。
在每一次傳代消化的時(shí)候,需要消化足夠長(zhǎng)的時(shí)間,要不停地在鏡下觀察細(xì)胞的消化狀態(tài)。因?yàn)檫@個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)的比
較厚,所以消化比較困難。需要耐心。CaCo-2 結(jié)腸癌細(xì)胞|細(xì)胞株而消化的結(jié)果應(yīng)該是保證足夠多的細(xì)胞都是成單個(gè)狀態(tài)而不是抱團(tuán)或者成片。
對(duì)于這一點(diǎn),常規(guī)消化是比較難做到的。所以需要采取點(diǎn)特殊措施,一般是這樣做的:
首先吸干凈原培養(yǎng)基,然后加入少量含EDTA的胰酶潤(rùn)洗,快速潤(rùn)洗完細(xì)胞生長(zhǎng)面后吸走,然后加入適量的胰
酶(一般較常用量多加0.5-1ml),進(jìn)行充分的消化,保持在鏡下適時(shí)觀察。等到較多細(xì)胞被消化下來(lái)懸浮于消
化液中,大部分細(xì)胞邊緣皺縮變清晰后,用吸管吸出消化液入離心管中加入適量培養(yǎng)基,常規(guī)離心5分鐘左右,
離心完后傾倒上清,加入新鮮培養(yǎng)基吹打均勻,然后放置于新的小培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。原培養(yǎng)瓶中加入培養(yǎng)基吹打,
細(xì)胞吹下來(lái)之后,適當(dāng)多吹打幾次細(xì)胞懸液以使細(xì)胞單個(gè)分離均勻。然后分瓶傳代,原瓶加入新培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
很關(guān)鍵的一點(diǎn)就是將胰酶的消化細(xì)胞懸液加培養(yǎng)基離心后培養(yǎng),因?yàn)檫@里面的細(xì)胞基本上都是被消化下來(lái)的單個(gè)單個(gè)
細(xì)胞,Caco-2細(xì)胞單個(gè)單個(gè)的生長(zhǎng)會(huì)比抱團(tuán)生長(zhǎng)的好很多。傳入新的培養(yǎng)瓶中之后可以與原瓶進(jìn)行比較。
A52905Centaurin γ1 中心體肌動(dòng)蛋白γ1抗體(增強(qiáng)型PI3K蛋白) 0.2ml
A52906FBN1 CaCo-2 結(jié)腸癌細(xì)胞|細(xì)胞株 原纖維蛋白1抗體 0.2ml
A52907FBP1 果糖1,6-二磷酸酯酶抗體 0.2ml
A52908FBP2 肌肉果糖二磷酸酶抗體 0.1ml
A52909FDC-SP/ADC 濾泡樹(shù)突細(xì)胞分泌蛋白抗體 0.1ml
A52910DCUN1D2 DCN1樣蛋白2抗體 0.2ml
A52911APBB1/Fe65 protein 鐵蛋白Fe65抗體 0.1ml
A52912phospho-APBB1 (Ser175) 磷酸化鐵蛋白Fe65抗體 0.1ml
A52913phospho-APBB1 (Ser347) 磷酸化鐵蛋白Fe65抗體 0.1ml
A52914Fumarate hydratase/FH 富馬酸水合酶抗體 0.2ml
A52915FGF1/AFGF 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml
A52916GCET1 B淋巴細(xì)胞生發(fā)中心相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
A52917FGF3/Oncogene INT2 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子3抗體 0.1ml
A52918FGF4 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子4抗體 0.1ml
A52919FGF5 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子5抗體 0.1ml
A52920FGF6 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子6抗體 0.1ml
A52921KCNK TWIK相關(guān)酸敏感鉀離子通道蛋白9抗體 0.2ml
A52922KDM4C/GASC1/JMJD2C 鱗狀細(xì)胞癌增強(qiáng)蛋白1抗體 0.1ml
A52923KGF/FGF7 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子7抗體 0.1ml
A52924FGF8/HBGF-8 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8抗體 0.1ml
A52925KLHL7 kelch樣蛋白7抗體 0.2ml
A52926FGF10 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10抗體 0.1ml
A52927FGF13 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子13抗體 0.2ml
A52928FGF16 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子16抗體 0.2ml
A52929FGF17 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子17抗體 0.2ml
A52930FGF19 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子19抗體 0.2ml
A52931FGF20 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子20抗體 0.2ml
A52932FGFBP 纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
A52933FGF22 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子22抗體 0.2ml
A52934FGF21 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21抗體 0.1ml
A52935bFGFR/FGFR1 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.1ml
A52936DAT1/LIM domain only 3 神經(jīng)細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體 0.2ml
A52937Phospho-FGFR1(Tyr653/654) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.1ml
A52938Phospho-FGFR1 (Tyr766) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.1ml
A52939Phospho-FGFR1 (Tyr307) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.1ml
A52940Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.1ml
A52941MOS 原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MOS抗體 0.2ml
A52942FGFR2/CD332 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2抗體 0.1ml
A52943FGFR3/CD333 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3抗體 0.1ml
A52944FGFR4/CD334 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4抗體 0.1ml